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黏粒 发布于:

由于真核基因的结构与功能研究的需要,人们发展出比λ噬菌体载体具有更大克隆能力的新型的载体--柯斯质粒载体(cosmidVetors,cosmid 是cos site carrying plasmid的缩写),也称为黏性质粒或黏粒。这是一类人工构建的含有抗性基因、单一克隆位点以及λDNACOS位点(体外包装所必需) 的细菌质粒。黏粒DNA 和外源DNA 经酶切后,需在较高浓度下连接,使两个COS 位点之间有一个完整的质粒序列。当体外包装时,带有外源DNA 的重组黏粒在COS 位点上被切开,包装成为成熟的噬菌体颗粒。这样,噬菌体颗粒在感染菌体内重组DNA 通过噬菌体的黏端而环化,并可以在宿主内自我复制,表达抗性标记。

黏粒英文cosmid,指带有黏端位点(cos)的质粒。黏粒是由人工构建的含有λ噬菌体DNA的cos序列和质粒复制子的载体。黏粒的组成包括质粒复制起点(ColE1)、氨苄青霉素抗性标记、cos位点。黏粒有4个特点:①具有λ噬菌体的特性。黏粒在克隆了外源DNA在体外包装成噬菌体颗粒后,可以感染宿主菌并在细菌内按照λ噬菌体DNA的方式环化起来。但黏粒载体不含有λ噬菌体的全部必要基因,因此不会使宿主菌裂解,无法形成子代噬菌体颗粒。②具有质粒的特性。黏粒具有质粒复制子,可在宿主菌内像质粒DNA一样进行复制。③克隆外源DNA的容量大。黏粒自身相对较小,一般只有5~7kb,而最大的克隆片段可达45 kb左右。④能与有同源序列的质粒进行重组。


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