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革兰阴性菌 发布于:

革兰阴性菌是细菌中的一大类。人们为对细菌进行分类,常用一种染色方法,即先将细菌涂在玻片上,用结晶紫初染,加入碘液后用酒精脱色,最后用稀复红复染。经一系列处理后,菌体呈现紫色的为革兰氏阳性菌,如乳酸杆菌、破伤风杆菌、链球菌、葡萄球菌等,均属这种类型;反之,有些细菌经以上的处理菌体呈红色为革兰氏阴性菌,如痢疾杆菌、脑膜炎双球菌等。这种方法最初是丹麦医师革兰首先发现和使用的,所以得此名。

革兰阴性菌泛指革兰氏染色反应呈红色的细菌。在革兰氏染色实验中,首先添加了龙胆紫(crystal violet),再添入另一种复染染料,通常使用番红(safranin)或品红(fuchsine),从而将所有的革兰氏阴性菌染成红色或粉色。通过这种测试我们可以区分两种细胞壁结构不同的细菌。革兰氏阳性菌在反应后的除色溶液中将呈现龙胆紫的颜色。

无论阳性菌还是阴性菌都有杆菌和球菌。葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌是临床最为常见的病原菌,葡萄球菌属于革兰阳性球菌,大肠杆菌属于革兰阴性菌中的肠杆菌科,除大肠杆菌以外,临床较常见的肠杆菌科细菌还有变形杆菌、沙门氏菌、克雷白杆菌;绿脓杆菌属于假单胞菌,为非发酵菌,是临床常见的较耐药革兰阴性杆菌 。

革兰阴性杆菌

有鞭毛

有菌毛和微荚膜,不形成芽胞

专性需氧菌

嗜肺军团菌引起军团菌病,多流行于夏秋季节,治疗不当,死亡率可达15%。

革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师Gram创立的。革兰氏染色法(Gram stain)不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌,用G+表示;染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌,用G-表示。

细菌对于革兰氏染色的不同反应,是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的,在染色过程中,当用乙醇处理时,由于脱水而引起网状结构中的孔径变小,通透性降低,使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色,因此,呈现蓝紫色;革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低,没有磷壁酸,其细胞壁中游肽桥、肽尾和双糖形成的网状结构较为疏松,而脂类物质含量高,当用乙醇处理时,脂类物质溶解,细胞壁的通透性增加,使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色,然后又被染上了复染液(番红)的颜色,因此呈现红色 。

革兰氏阳性细菌:金黄葡萄球菌、链球菌、肠球菌、利斯特菌等

革兰氏阴性杆菌:克雷白杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、流感嗜血杆菌、沙门氏菌等

主要是各种抗生素。但由于日益严重的抗药性,许多抗生素已失去往日的辉煌,如青霉素等。而且对于革兰阴性菌,如使用抗生素不当,会加重病情的发展。因为革兰阴性菌的多聚糖外还有一层外膜,外膜由特异多糖,核心多糖和脂类A组成。而脂类A是内毒素的毒性部分和主要成分,若乱用抗生素,会破坏特异多糖和核心多糖,使得脂类A暴露,释放内毒素,加重病情。不少医生也在乱用抗生素,患者应当去正规医院接受治疗与用药。

重症肺炎患者因常伴有基础疾病,往往预后不佳,死亡率高,而抗感染对其治疗至关重要,本次研究发现,重症肺炎的主要致病菌是革兰阴性菌,占74.8%,其中铜绿假单胞菌位于首位,表2中可看到该菌除头孢吡肟(25.0%),哌拉西林-三唑巴坦(27.8%),头孢他啶(27.8%),亚胺培南(30.5%),环丙沙星(33.3%)以外,对其他各药均耐药严重,铜绿假单胞菌可通过多种机制产生耐药,包括与酶的修饰作用,膜孔蛋白丢失,靶位改变以及反泵作用 ,还认为此菌表面可产生生物被膜,而大环内酯类药物可抑制中的藻酸盐的合成,从而使抗生素对铜绿假单胞菌的渗透力增强。而氟喹诺酮类被认为是对生物被膜渗透性最佳的抗生素 。值得关注的是,铜绿假单胞菌可以长期处于带菌状态,在对重症肺炎的诊治过程中,曾有2例气管插管患者,气管吸出痰标本以及肺灌洗液多次培养均为铜绿假单胞菌,但按照其药敏实验结果,规则使用抗铜绿假单胞菌药物治疗后,患者临床症状无改善,复查痰培养仍为铜绿假单胞菌,故认为,即使患者多次培养均为铜绿假单胞菌,但治疗者仍应结合患者的临床情况、痰液的变化综合判断究竟此菌是带菌状态,还是感染状态,对降低铜绿假单胞菌对各种抗生素的耐药率也有很大意义。

鲍曼不动杆菌共分离出16株,除亚胺培南和阿米卡星以外,对其他抗生素的耐药率高达43.8%~93.8%,这与其耐药机制复杂多变有关,此外,因此菌生命力很强,容易造成感染爆发流行。治疗上首选亚胺培南,必要时可联用氨基糖甙类药物。而酶抑制剂舒巴坦对不动杆菌有独特的抗菌活性,故治疗上可选用含舒巴坦的复合制剂。

本次研究发现,大肠埃希菌,肠杆菌属,肺炎克雷伯菌的ESBLs的检出率最高,分别是55.6%,40.0%和25.0%,对这三种细菌抗菌活性最高的是亚胺培南,哌拉西林—三唑巴坦和头孢吡肟,对产ESBLs菌而言,不同的ESBLs对不同的三代头孢菌素具有不同的活性,某些ESBLs能赋予细菌对所有B-内酰胺类抗生素高水平的耐药,而仅轻微提高耐药性,而头孢噻肟和头孢他啶则是识别不同ESBLs的最佳底物 。亚胺培南是治ESBLs菌的首选药。

嗜麦芽窄食单胞菌也是重症肺炎较常见的多重耐药致病菌,本次监测,除对左氧氟沙星(33.3%)外,对其他抗生素均耐药严重,因其外膜通透性低,且可诱导B-内酰胺类L2、L1存在,所以对B-内酰胺类抗生素,氨基糖甙类,碳青霉烯类均高度耐药,故该菌的感染已成为临床治疗的难题,研究发现,复方磺胺甲恶唑和替卡西林-棒酸是治疗嗜麦芽窄食单胞菌感染最为有效的药物。

近年来,因广谱抗生素的广泛使用,使革兰阴性菌如铜绿假单胞菌,肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌的感染日益增加,这些致病菌的耐药严重,则是重症肺炎治疗困难,死亡率高的主要原因之一。在重症肺炎治疗上,宜采用抗生素降阶梯疗法策略,抗菌谱应尽可能覆盖所有致病菌,可经验性优先选用亚胺培南、哌拉西林—三唑巴坦和头孢吡肟,加酶抑制剂的第三代头孢菌素以及新喹诺酮类,获得细菌学结果后,再根据药敏结果和临床情况,改用针对性强的抗生素及降阶梯治疗。同时必须注意对ESBLs的检测,加强监控和管理,防止ESBLs菌株的扩散和爆发流行。


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